（一）液相色譜分析實驗室的概述

   主要體現在高效率分離，對復雜的有機化合物分離制取純凈化合物，定量分析和定性分析，儀器設備主要有：高效液相色譜儀，適宜于高沸點化合物、難揮發化合物、熱不穩定化合物、離子化合 物、高聚物等，彌補氣相色譜儀的不足。環境和實驗室基礎裝備設計要求與氣相色諳室相近。液相色譜法是指流動相為液體的技術。早期的液相色譜（經典液相色譜）是將小體積的試液注入色譜 柱上部，然后用洗脫液（流動相）洗脫。這種經典色譜法，流動相依靠自身的重力穿過色譜柱，柱效差(固定相顆粒不能太小)，分離時間很長。70年代初期發展起來的高效液相色譜法，克服了經典液相色譜法柱效低，分離時間很長的缺點。成為一種高效、快速的分離技術。高效液相色譜法是在經典色譜法的基礎上，引用了氣相色譜的理論，在技術上，流動相改為高壓輸送（***高輸送壓力可達4.9´107 Pa）;色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經典液相色譜（每米塔板數可達幾萬或幾十萬）；同時柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進行連續檢測 。

（二）高效液相色譜分析法的特點

 1.高壓：液相色譜法以液體為流動相（稱為載液），液體流經色譜柱，受到阻力較大，為了迅速地 通過色譜柱，必須對載液施加高壓。一般可達150～350×105 Pa。      

2.高速：流動相在柱內的流速較經典色譜快得多，一般可達1～10ml/min。高效液相色譜法所需的分析時間較之經典液相色譜法少得多，一般少于1h 。      

 3.高效：近來研究出許多新型固定相，使分離效率大大提高。       

 4.高靈敏度：高效液相色譜已廣泛采用高靈敏度的檢測器，進一步提高了分析的靈敏度。如熒光檢 測器靈敏度可達10-11 g。另外，用樣量小，一般幾個微升。      

 5.適應范圍寬：氣相色譜法與高效液相色譜法的比較：氣相色譜法雖具有分離能力好，靈敏度高，分析速度快，操作方便等優點，但是受技術條件的限制，沸點太高的物質或熱穩定性差的物質都難于應用氣相色譜法進行分析。而高效液相色譜法，只要求試樣能制成溶液，而不需要氣化，因此不受試樣揮發性的限制。對于高沸點、熱穩定性差、相對分子量大（大于 400 以上）的有機物（這些物質幾乎占有機物總數的 75% ～ 80% ）原則上都可應用高效液相色譜法來進行分離、分析。 據統計，在已知化合物中，能用氣相色譜分析的約占20%，而能用液相色譜分析的約占70～80%。

 （三）檢測器

(1)紫外光度檢測器      

  它的作用原理是基于被分析試樣組分對特定波長紫外光的選擇性吸收，組分濃度與吸光度的關系遵守 比爾定律。***常用的檢測器，應用***廣，對大部分有機化合物有響應。     

特點：

a.靈敏度高：其***小檢測量10-9g·mL-1 ，故即使對紫外光吸收很弱的物質，也可以檢測；     

b. 線性范圍寬；(比爾定律)      

c. 流通池可做的很�。�1mm × 10mm ，容積 8μL）；     

d. 對流動相的流速和溫度變化不敏感,可用于梯度洗脫；      

e. 波長可選，易于操作:如，使用裝有流通池的可見紫外分光光度計（可變波長檢測器）。    

缺點：對紫外光完全不吸收的試樣不能檢測；同時溶劑的選擇受到限制。     

(2)光電二極管陣列檢測器    

 紫外檢測器的重要進展；陣列由1024個光電二極管陣列，每個光電二極管寬僅50μm，各檢測一窄段波 長。如圖所示，在檢測器中，光源發出的紫外或可見光通過液相色譜流通池，在此流動相中的各個組分進行特征吸收，然后通過狹縫，進入單色其進行分光，***后由光電二極管陣列檢測，得到各個組分的吸收信號。經計算機快速處理，得三維立體譜圖。       

(3)熒光檢測器      

 熒光檢測器是一種高靈敏度、高選擇性檢測器。對多環芳烴，維生素B、黃曲霉素、卟啉類化合物、農藥、藥物、氨基酸、甾類化合物等有響應.熒光檢測器的結構及工作原理和熒光光度計相似。      

(4)差示折光檢測器   

  除紫外檢測器之外應用***多的檢測器。  差示折光檢測器是借連續測定流通池中溶液折射率的方法來測定試樣濃度的檢測器。溶液的折射率是純溶劑（流動相）和純溶質（試樣）折射率乘以各物質的濃度之和。因此溶有試樣的流動相和純流動相之間折射率之差表示試樣在流動相中的濃度。     

(5)電導檢測器      

其作用原理是根據物質在某些介質中電離后所產生電導變化來測定電離物質含量。

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